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BellBrook Labs:Transcreener cGAMP cGAS試劑盒

發布者:2022世界杯竞猜app下载技    發布時間:2022-10-26     
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cGAS及cGAS-STING通路

cGAS-STING信號通路最初是作為天然免疫係統的一個重要組成部分被發現,其功能是檢測胞漿DNA的存在,並在反應中觸發炎症基因的表達。DNA通常存在於細胞核中,異常在胞漿中定位的DNA與腫瘤的發生或病毒感染有關,環狀GMP-AMP合成酶(cyclic GMP-AMP Synthasec,cGAS)感知到本不應出現在細胞質的DNA時,會催化GTP和ATP之間發生化學反應並生成一種被稱為環鳥腺苷酸(cvclic GMP-AMP cGAMP)的小分子,該小分子作為先天免疫係統的信使,會進一步激活免疫反應。因比,cGAS就像一個防盜報警器,cGAMP則是防盜報警器產生的電信號。cGAMP結合並激活STING,後者是一種作為細胞對異常胞漿DNA作出免疫應答的關鍵組分的跨膜接頭蛋白,STING被激活後隨TBK1從內質網一起轉位至核周內體。TBK1激酶磷酸化並激活幹擾素調節因子(IRFs)和NF-KB,後者誘導Ⅰ型幹擾素和其他免疫應答基因。  


cGAS及cGAS-STING通路


2013年發現cGAS後不久,自我DNA的異常激活被證明是導致衰弱甚至致命的自身免疫性疾病的基礎,如係統性紅斑狼瘡(SLE)和Aicardi–Goutieres綜合征(AGS)。動物模型中的敲除研究清楚地表明,抑製cGAS是一種有希望的治療幹預方法,使得cGAS成為近些年熱門的先天免疫靶點的酶。這裏給大家帶來全球領先先導藥物高通量篩選專家BellBrook研發的cGAS抑製劑高通量篩選工具——Transcreener cGAMP cGAS檢測試劑盒,可助力全球製藥和生物技術公司、CRO和學術實驗室加速藥物發現。    


Transcreener cGAMP cGAS檢測法通過測定生成的cGAMP來測定cGAS酶的活性。通過檢測cGAMP輸出,該方法提供了一種實時評估任何cGAMP產生酶活性的通用方法。Transcreener cGAMP檢測技術使用了一種簡單但高效的方法,包括cGAMP特異性抗體搭配遠紅熒光的示蹤劑。反應中產生的cGAMP與示蹤劑競爭,改變熒光特性並提供熒光讀出。cGAS分析可用於熒光偏振(FP)時間分辨-熒光共振能量轉移(TR-FRET)兩種方式進行檢測~


熒光偏振(FP)法原理示意圖

熒光偏振(FP)法原理示意圖

時間分辨-熒光共振能量轉移(TR-FRET)法示意圖

時間分辨-熒光共振能量轉移(TR-FRET)法示意圖


參考用途:

  • cGAS酶活性檢測

  • 篩選cGAS抑製劑化合物庫

  • 量化抑製劑效力

  • 確定cGAS-抑製劑滯留時間


相關實驗驗證數據請參見:Targeting the cGAS-STING Pathway Using a Homogenous, HTS Compatible Transcreener? cGAS Assay 


Transcreener cGAMP cGAS試劑盒優勢:


操作簡便,高通量,兼容96, 384和1536孔模式~

操作簡便,高通量,兼容96, 384和1536孔模式~

出色的信號穩定性:24小時以上的信號依舊穩定性

出色的信號穩定性:24小時以上的信號依舊穩定性


產品性能展示:


cGAS由雙鏈DNA激活,需要ATP和GTP底物來生產cGAMP

cGAS和 cGAMP 線性

cGAS由雙鏈DNA激活,需要ATP和GTP底物來生產cGAMPcGAS和 cGAMP 線性

第一步輕鬆高通量篩選處化合物庫

後續通過劑量反應確定抑製劑效力

第一步輕鬆高通量篩選處化合物庫後續通過劑量反應確定抑製劑效力

cGAS被dsDNA激活

ATP和GTP依賴

cGAS被dsDNA激活ATP和GTP依賴


Transcreener cGAMP cGAS試劑盒組分:


組分描述
cGAMP Antibody二核苷酸cGAMP特異的抗體。
Tracer熒光的變化可以在FP或TR-FRET中讀取
Stop & Detect Buffer B, 10X一種可以用來終止酶反應的緩衝液,用於終點法讀數
ATPATP可用於酶反應和標準曲線
GTPGTP可用於酶反應和標準曲線
cGAMP標準品
Interferon Stimulatory DNAISD是一種45-bp的低聚物,用於激活cGAS酶


需要自備的試劑及儀器:


名稱描述
cGAS酶cGAS(Cat# 2227)可以從艾美捷購買。
酶緩衝液我們通常使用含有20 mM TRIS (pH 7.5), 5 mM MgCl2, 0.01% Brij-35和1% DMSO(測試化合物的溶劑)的酶緩衝液,使用最適合你的酶條件的緩衝液。
檢測用板子FP 格式:黑色板子,推薦康寧384孔板(Cat# 4514) TR-FRET格式:白色板子,推薦康寧384孔板(Cat #4513) 均可從艾美捷購買~
讀板器需要能檢測熒光偏振或者TR-FRET的讀板器
移液器使用液體處理設備,可以精確分配亞微升體積到384孔板。
超純水一些去離子水係統被核酸酶汙染,核酸酶可以降解核苷酸底物和產物,降低了檢測性能。小心處理和使用超純水可以消除這個潛在的問題


相關產品推薦:


類別貨號名稱規格
熒光偏振法的試劑盒3024-1KTranscreener cGAMP cGAS FP Assay (1,000 Assay, 384 Well)1000 Assay
3024-10KTranscreener cGAMP cGAS FP Assay (10,000 Assay, 384 Well)10000 Assay
3024-100KTranscreener cGAMP cGAS FP Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well)10X10000 Assay
TR-FRET法的試劑盒3025-1KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (1,000 Assay, 384 Well)1000 Assay
3025-10KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10,000 Assay, 384 Well)10000 Assay
3025-100KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well)10X10000 Assay
cGAS2227Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human, Full-Length, 10 ?g10 ?g
2228Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human,?Full-Length,?100 ?g100 ?g
cGAS酶+試劑盒3024-1K-BIncludes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 ?g Human cGAS Enzyme1000 Assay+20 ?g
3024-10K-BIncludes Transcreener cGAS FP Assay 10K Kit and 200 ?g Human cGAS Enzyme10000 assay+200 ?g
3025-1K-BIncludes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K Kit and 20 ?g Human cGAS Enzyme1000 Assay+20 ?g
3025-10K-BIncludes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K Kit and 200 ?g Human cGAS Enzyme10000 assay+200 ?g
3024-1K-BIncludes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 ?g Human cGAS Enzyme1000 Assay+20 ?g
黑色板子2233Corning 96-Well Black Assay Plates (#3686), 3-Pack (200+ Assays)3-Pack
2229Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 3-Pack (1,000+ Assays)3-Pack
2230Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 30-Pack (10,000+ Assays)30-Pack
白色板子2234Corning 96-Well White Assay Plates (#3642), 3-Pack (200+ Assays)3-Pack
2231Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 3-Pack (1,000+ Assays)3-Pack
2232Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 30-Pack (10,000+ Assays)30-Pack


Note:以上產品僅用於科研,不能用於醫療及診斷~ 


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